如何繼續(xù)培養(yǎng)已購買的細胞

<p>為防止客戶接納不妥形成細胞逝世。我公司溫馨提示;細胞一般經(jīng)我司培育兩周復蘇后送與客戶。因細胞是冷凍保存，我司均以冰袋加泡沫箱快遞運輸.客戶在接納細胞產(chǎn)品時，需按以下辦法操作。防止細胞呈現(xiàn)其他問題。<br /> 1. 收到細胞株包裹時，請檢測細胞株冷凍管是否有凍結景象，若有請當即告訴。細胞株請盡速開始培育，或當即冷凍保存(置于&ndash;70 &deg;C，隔夜后，移到液氮)。<br /> 2. 冷凍細胞凍結程序: 2.1. 根據(jù)細胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎培育基品種、血清品種和其它指定之成份和份額，制備培育基。絕大多數(shù)之細胞均無法當即習慣不同之基礎培育基或不同之血清品種，若因試驗需要，有必要有所不同時，必須以緩慢份額逐步改動培育基組成，斷定細胞習慣后，方進行所需之試驗。 2.2. FBS (fetal bovine serum, 胚牛血清), CS (calf serum, 小牛血清)和HS (horse serum, 馬血清)，對細胞而言差異極大，請必須根據(jù)細胞株資料單指定之血清品種培育之。<br /> 3. 將培育基置于37 &deg;C 水槽中回溫，回溫后噴以70 % 酒精并擦洗之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，當即放入37 &deg;C 水槽中快速凍結，水面高度不行挨近或高過冷凍管之蓋沿，不然易發(fā)作污染。輕搖冷凍管使其在1 分鐘內(nèi)全部融化后，以70 % ethanol 擦洗冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。<br /> 4. 根據(jù)細胞品種和濃度，于無菌操作臺內(nèi)取10 ml 培育基加至T25 或T75 flask中。取出已凍結之細胞懸浮液，緩緩加入T25 或T75 flask 內(nèi)之培育基，混合均勻，放入37 &deg;C，5 % CO2 培育箱培育。<br /> 5. 對絕大多數(shù)細胞而言，1 % 以下之冷凍保護劑DMSO，不會對細胞之貼附或活化有不良影響，不需馬上由凍結細胞中去除，待第二天斷定細胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO 靈敏或會形成細胞分解之細胞，需當即去除DMSO 者， 則可將凍結后之細胞懸浮液放入5 - 10 ml 培育基中，離心300 xg (約1000 rpm)，5 分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培育基，將細胞均勻混合后，轉移至培育瓶中，再放入37 &deg;C，5 % CO2 培育箱培育。&nbsp;</p>